引言

尿石素（Urolithins）是一类由肠道菌群代谢膳食多酚（如鞣花酸）生成的生物活性物质，近年来因其潜在的抗氧化、抗炎及抗衰老作用受到广泛关注。研究表明，尿石素的生成能力与个体肠道菌群组成密切相关，其浓度水平可反映宿主代谢状态及疾病风险。然而，由于个体间肠道菌群的差异性以及代谢过程的复杂性，尿石素的检测技术成为精准评估其生物效应的重要工具。本文将从检测范围、检测项目、检测方法及仪器等方面，系统阐述尿石素检测的关键技术与应用价值。

检测范围

尿石素检测主要应用于以下场景：

• 临床医学研究：评估尿石素与慢性疾病（如心血管疾病、癌症）的关联性；
• 营养与健康管理：监测膳食干预（如摄入坚果、石榴等富含鞣花酸食物）后的代谢响应；
• 肠道菌群分析：通过尿石素水平间接反映肠道菌群的多样性与功能活性；
• 药物开发：用于筛选促进尿石素合成的益生菌或代谢调节剂。

检测项目

尿石素检测的核心项目包括以下代谢产物及关联指标：

• 尿石素A（Urolithin A）：最具生物活性的形式，与抗炎和线粒体自噬调控相关；
• 尿石素B（Urolithin B）：次要代谢产物，抗氧化能力较弱；
• 尿石素C和D（Urolithin C/D）：中间代谢物，常见于特定菌群活跃个体；
• 肠道菌群标志物：如Gordonibacter属细菌的丰度，与尿石素合成能力呈正相关。

检测方法

目前主流的尿石素检测方法包括以下三类：

• 液相色谱法（HPLC）：通过色谱柱分离目标物，利用紫外或荧光检测器定量分析。该方法成本较低，但灵敏度相对有限，适用于尿液中高浓度样本；
• 液相色谱-质谱联用法（LC-MS/MS）：结合色谱分离与质谱高特异性，可同时检测多种尿石素异构体，检测限低至0.1 ng/mL，是研究级检测的金标准；
• 酶联免疫吸附法（ELISA）：基于抗体-抗原反应，操作简便且适合大批量筛查，但可能因交叉反应影响准确性。

检测仪器

尿石素检测需依赖精密仪器与配套设备，主要包括：

• 液相色谱系统：配备C18反相色谱柱及二极管阵列检测器（DAD），适用于基础实验室；
• 三重四极杆质谱仪：如Agilent 6470或Sciex QTRAP系列，提供高灵敏度和多反应监测（MRM）模式；
• 全自动酶标仪：用于ELISA法的吸光度读数，支持96孔板高通量分析；
• 样本前处理设备：包括离心机、固相萃取（SPE）装置及氮吹仪，用于去除基质干扰。

检测流程与质量控制

为确保结果可靠性，尿石素检测需遵循标准化流程：

• 样本采集：通常收集晨尿或24小时尿液，-80℃保存以避免降解；
• 前处理：采用β-葡萄糖醛酸酶水解结合SPE纯化，释放游离态尿石素；
• 内标校准：添加同位素标记的尿石素-d4作为内标，校正基质效应与回收率偏差；
• 数据验证：通过加标回收实验（回收率需≥85%）和重复性测试（RSD<15%）确保方法稳定性。

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